肝組織HE服務(wù)是病理學(xué)診斷中常用的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，通過(guò)蘇木精-伊紅（HE）染色法對(duì)肝組織切片進(jìn)行染色，以清晰顯示細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，輔助醫(yī)生進(jìn)行疾病診斷和研究。

　　該服務(wù)基于HE染色的經(jīng)典原理：蘇木精作為堿性染料，使細(xì)胞核中的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體呈現(xiàn)紫藍(lán)色；伊紅作為酸性染料，使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞間質(zhì)中的成分呈現(xiàn)紅色或粉紅色。通過(guò)這兩種染料的結(jié)合，肝組織中的細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)及病理變化得以清晰呈現(xiàn)。

　　肝組織HE服務(wù)是病理檢測(cè)中常用的技術(shù)，用于觀察肝組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)、細(xì)胞排列及病理改變（如炎癥、壞死、纖維化等）。其操作需嚴(yán)格遵循規(guī)范，以確保切片質(zhì)量和診斷準(zhǔn)確性。以下是相關(guān)注意事項(xiàng)：

　　一、標(biāo)本采集與固定階段

　　標(biāo)本采集

　　肝組織取材需迅速，避免因缺血、自溶導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞（尤其是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或手術(shù)標(biāo)本，應(yīng)在離體后30分鐘內(nèi)固定）。

　　取材大小適中：通常為1cm×1cm×0.3cm（厚度不超過(guò)0.5cm），確保固定液能充分滲透組織，避免中心部位固定不良。

　　若為肝穿刺標(biāo)本，需標(biāo)記穿刺方向，避免切片時(shí)遺漏關(guān)鍵區(qū)域；若組織易碎（如肝硬化標(biāo)本），需輕柔操作，防止機(jī)械損傷。

　　固定處理

　　固定液選擇：使用10%中性福爾馬林（甲醛濃度3.7%~4%，pH 7.0~7.4），固定液體積應(yīng)為組織體積的5~10倍，避免因液體不足導(dǎo)致固定不充分。

　　固定時(shí)間：常規(guī)肝組織固定6~24小時(shí)（小型標(biāo)本6~12小時(shí)，較大標(biāo)本12~24小時(shí)），過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致組織過(guò)硬，影響切片；過(guò)短則細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清。

　　特殊情況：若需保留糖原等成分，可使用冷固定液（4℃）；若組織含較多血液，可先用生理鹽水沖洗后再固定。

　　二、組織處理（脫水、透明、包埋）

　　脫水

　　梯度乙醇脫水：依次經(jīng)70%、80%、95%（Ⅰ、Ⅱ）、100%（Ⅰ、Ⅱ）乙醇處理，每步時(shí)間根據(jù)組織大小調(diào)整（通常30~60分鐘），確保徹d脫去水分。

　　避免跳過(guò)低濃度乙醇直接用高濃度，否則可能導(dǎo)致組織收縮、細(xì)胞變形（尤其肝血竇豐富，易受影響）。

　　透明與浸蠟

　　透明劑（如二甲苯）需新鮮，避免雜質(zhì)污染，透明時(shí)間適中（通常15~30分鐘），過(guò)長(zhǎng)會(huì)使組織變脆，過(guò)短則蠟無(wú)法充分浸潤(rùn)。

　　浸蠟需在恒溫箱中進(jìn)行（60℃左右），使用熔點(diǎn)56~58℃的石蠟，分2~3次浸蠟（每次30~60分鐘），確保蠟完q取代透明劑，避免切片時(shí)出現(xiàn)空洞。

　　包埋

　　包埋時(shí)肝組織需放平，切面朝下，確保后續(xù)切片能完整顯示肝小葉結(jié)構(gòu)（中央靜脈、匯管區(qū)等關(guān)鍵區(qū)域）。

　　包埋蠟塊需冷卻充分，避免蠟塊內(nèi)有氣泡，否則切片易碎裂。

　　三、切片與貼片

　　切片

　　切片厚度控制在3~5μm（肝組織較柔軟，過(guò)厚易重疊，過(guò)薄易破碎），使用鋒利的切片刀或一次性刀片，避免刀痕。

　　切片時(shí)保持蠟塊溫度穩(wěn)定（可使用恒溫切片機(jī)），防止組織皺縮或斷裂，尤其肝硬化組織因纖維化較硬，需調(diào)整切片角度和速度。

　　貼片與烤片

　　貼片前需清潔載玻片（避免油污影響?zhàn)じ剑?，可使用多聚賴氨酸或APES處理載玻片，防止脫片。

　　切片在45~50℃溫水浴中展平（水溫過(guò)高可能導(dǎo)致細(xì)胞脫落），輕輕撈取后瀝干水分，置于60~65℃烤箱中烤片2~4小時(shí)（或37℃過(guò)夜），徹d烘干水分，避免染色時(shí)脫片。

　　四、染色過(guò)程

　　脫蠟與水化

　　二甲苯脫蠟需徹d（2次，每次5~10分鐘），后續(xù)經(jīng)梯度乙醇（100%、95%、80%、70%）水化至蒸餾水，每步1~3分鐘，避免脫蠟不凈導(dǎo)致染色不均。

　　蘇木精染色

　　蘇木精染液需新鮮（或過(guò)濾后使用），染色時(shí)間根據(jù)染液濃度和組織類型調(diào)整（通常5~10分鐘），肝細(xì)胞核應(yīng)染成深藍(lán)色，避免過(guò)染（導(dǎo)致核結(jié)構(gòu)模糊）或欠染（核不清）。

　　分化步驟關(guān)鍵：用1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒至數(shù)十秒，直至組織變?yōu)榈凵?，立即用流水沖洗返藍(lán)（10~15分鐘），確保核質(zhì)對(duì)比清晰。

　　伊紅染色

　　伊紅染液染色時(shí)間通常1~3分鐘，使肝細(xì)胞質(zhì)、結(jié)締組織等染成粉紅色，染色后經(jīng)梯度乙醇脫水（70%、80%、95%、100%），避免水分殘留導(dǎo)致褪色。

　　透明與封片

　　二甲苯透明需充分（2次，每次5分鐘），確保切片透明無(wú)霧狀。

　　封片時(shí)使用中性樹(shù)膠，避免產(chǎn)生氣泡，蓋玻片需緩慢放下，防止擠壓組織，封片后平放晾干（或37℃烘干），避免樹(shù)膠流淌。

　　五、質(zhì)控與存儲(chǔ)

　　質(zhì)量控制

　　染色后需鏡檢：肝小葉結(jié)構(gòu)完整，肝細(xì)胞、膽管、血管等形態(tài)清晰，核質(zhì)對(duì)比分明（核藍(lán)、質(zhì)紅），無(wú)皺縮、脫片、染色不均等問(wèn)題。

　　若出現(xiàn)異常（如脫片、染色過(guò)淺），需追溯原因（如烤片不充分、染液失效）并重新處理。

　　標(biāo)本與切片存儲(chǔ)

　　剩余肝組織標(biāo)本需在固定液中冷藏（4℃）保存，標(biāo)記清晰（編號(hào)、取材日期、患者信息等）。

　　染色后的切片需避光、干燥存儲(chǔ)，避免陽(yáng)光直射導(dǎo)致褪色，長(zhǎng)期保存可使用密封盒防潮。