裸鼠皮下成瘤模型構(gòu)建的基本步驟和技術(shù)要點(diǎn)

裸鼠皮下成瘤模型（Cell Derived Xenograft, CDX模型）的構(gòu)建是一種常用的腫瘤模型，它涉及將體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞注射到裸鼠的皮下組織中，以模擬腫瘤的生長

和擴(kuò)散。

以下是構(gòu)建裸鼠皮下成瘤模型的關(guān)鍵步驟和技術(shù)要點(diǎn)：

  1.動物選擇：通常選擇4-6周齡的Nude裸鼠，并在特殊病原體自由（SPF）環(huán)境中適應(yīng)至少一周。

  2.細(xì)胞準(zhǔn)備：選擇適合的腫瘤細(xì)胞株，并在接種前將細(xì)胞培養(yǎng)至對數(shù)生長期，細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%左右。使用0.25%yimei消化細(xì)胞，并用無血清培養(yǎng)基洗滌和計

                      數(shù)，調(diào)整細(xì)胞懸液至適宜的接種濃度，通常為5×10^6個細(xì)胞/200μL。

  3.接種步驟：在接種前，用75%酒精對裸鼠的注射部位進(jìn)行消毒。使用1ml注射器進(jìn)行皮下注射，注射深度約1cm。注射時應(yīng)緩慢推進(jìn)針頭，并在注射完畢后緩慢

                      退出針頭，以避免細(xì)胞懸液泄漏。

  4.成瘤監(jiān)測：注射后通常在3天內(nèi)開始肉眼觀察，并定期記錄裸鼠的體重和腫瘤的大小。腫瘤體積的計算公式為V = (長軸 × 短軸^2) / 2。

  5.注意事項：確保細(xì)胞活性，接種時細(xì)胞應(yīng)保持在低溫下。注射后應(yīng)密切觀察裸鼠的健康狀況，以評估腫瘤的生長和藥物治療的效果。如果在預(yù)定時間內(nèi)未見腫瘤

                     形成，可能需要檢查細(xì)胞活力、動物健康狀況或接種技術(shù)。

優(yōu)化裸鼠皮下成瘤模型構(gòu)建的技巧和建議

  1.選擇健康狀態(tài)良好的裸鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以提高成瘤率。

  2.確保使用新鮮、活力高的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行接種。

  3.接種操作應(yīng)迅速而準(zhǔn)確，以減少細(xì)胞暴露在非理想環(huán)境中的時間。

  4.監(jiān)控和維護(hù)適宜的飼養(yǎng)環(huán)境，以支持裸鼠和腫瘤的生長。

  5.對于難以成瘤的細(xì)胞株，可以考慮使用其他免疫缺陷小鼠品系，如NOD-SCID或NOG小鼠。

通過遵循上述步驟和注意事項，可以有效地構(gòu)建裸鼠皮下成瘤模型，用于腫瘤生物學(xué)研究和藥物測試。

參考：

[1]賈羅琦王超程明軍孫建, 裸大鼠人乳腺癌皮下移植瘤模型的建立和評價. 學(xué)報(醫(yī)學(xué)版), 2014. 41(05): 第685-689頁.