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瑞士姬姆薩復合染色

簡要描述:瑞士姬姆薩復合染色染大量樣品特別是切片樣品時,吉姆薩染色的用途更廣。吉姆薩(Giemsa)染色法常用于血液學、脫落細胞學和病原生物學的顯微觀察。該法實際上是一種雙重染色,特點是堿性和酸性染色劑同時著染。

  • 更新時間:2024-04-12
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詳細介紹

瑞士姬姆薩復合染色原理

吉姆薩(Giemsa)染色法常用于血液學、脫落細胞學和病原生物學的顯微觀察。該法實際上是一種雙重染色,特點是堿性和酸性染色劑同時著染。其中,堿性染色劑主要為天青II(azure B,天青為亞甲基藍的氧化形式),酸性染色劑為伊紅Y,染色結果清晰。美中不足是染色后如果常規(guī)脫水會褪色,因此只能晾干封片。這就限制了本法在常規(guī)切片染色中的應用。

吉姆薩固體粉劑含有天青II和伊紅Y這兩種染色劑,通常能購買到現成的商品。如果沒有,可將伊紅Y與天青II按一定質量比混合,效果相當。

根據經驗,染血細胞和某些脫落細胞,伊紅和天青的質量比為15 ?4(A型);如果染一般切片的結構,伊紅與天青的質量比為3?4(B型)。如果加入亞甲基藍,伊紅、天青、亞甲基藍的質量比為2?1?4(C型),染細胞和切片均可。有時嫌伊紅著色太淺,也可在配制染液時額外補充少量伊紅(配液要用甲醇;有的甲醇純度不夠,可能含有微量乙酸成分,會沉淀部分伊紅)。

吉姆薩染液一般先配制成母液儲存,臨用前用緩沖液稀釋成工作液。

瑞士姬姆薩復合染色注意事項

配制時,先將吉姆薩粉劑用丙三醇少量多次研磨溶解,然后密閉于60 ℃恒溫箱2 h;加入甲醇并充分混勻后,繼續(xù)放置在37 ℃恒溫箱24 h,然后過濾即為母液。如果無明顯沉淀物,也可直接密閉保存。只要嚴格密閉、避光,母液的穩(wěn)定性良好,至少可存放5年。保存期間嚴禁吸潮,否則容易產生沉淀而失效。

臨用前取上述母液,用pH 6.8 ~ 7.0的緩沖液按1? 9(v/v)稀釋并過濾,即為染色工作液。工作液必須在數小時內用完,否則很快產生沉淀,失去染色效力。

具體方法如下:

血液等涂片穩(wěn)固后,須用甲醇充分固定5 ~ 15 min;

→ 稍晾干,浸入吉姆薩工作液染色15 ~ 30 min(根據標本情況預試確定時間);

→ 蒸餾水或pH 6.8 ~ 7.0的磷酸鹽緩沖液漂洗涂片1 ~ 3 min;

→ 蒸餾水快速漂洗;

→ 空氣中自然晾干玻片;

→ 滴加中性樹膠,加蓋玻片封固。



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