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當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章

  • 2022

    4-30

    實驗方法原理藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實驗中,當(dāng)動物死亡率為50%時的單次給藥劑量,單位通常為mg/kg。例如,當(dāng)某藥物給予400mg劑量時,可致使一半家兔(體重約為4kg)死亡,則其LD50值為100mg/kg。LD50值通常反映藥物急性毒性的大小。藥物的急性毒性、慢性毒性實驗同屬于一般毒理學(xué)的研究范疇。此外,藥物毒理學(xué)研究尚包括特殊毒理學(xué)(致癌、致畸、致突變)、藥物依賴性及過敏反應(yīng)實驗等。各種屬動物均可用于藥物L(fēng)D50值的測定,通常使用嚙齒類動物(大鼠和小鼠)...

  • 2022

    4-30

    【實驗?zāi)康摹?.學(xué)習(xí)大鼠胃潰瘍(gastriculcer)模型建立的方法。2.觀察藥物對實驗性胃潰瘍的防治作用。3.了解組織切片和HE染色方法?!緦嶒炘怼肯詽?pepticulcer)是由多種因素引起的一種常見病。正常情況下,機(jī)體有胃黏液、胃黏膜屏障(mucosalbarrier)、黏膜細(xì)胞更新以及胃、十二指腸節(jié)律性運動功能等一系列保護(hù)性機(jī)理,使胃、腸黏膜不受損傷。但過度的精神緊張、情緒激動,會使神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌功能紊亂;飲食失調(diào),如粗糙食物,骨刺等對黏膜的物理性損害...

  • 2022

    4-30

    實驗材料細(xì)胞樣品試劑、試劑盒RNA提取試劑盒熒光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆轉(zhuǎn)錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚蘭儀器、耗材離心管離心機(jī)風(fēng)光光度計電泳槽凝膠板RealtimePCR儀一、樣品RNA的抽提1.取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。2.兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃...

  • 2022

    4-23

    ELISA實驗因靈敏度高,特異性強(qiáng)在生物科研上得到了廣泛的認(rèn)可,但對初學(xué)者而言,如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié),可能會對最終的實驗結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響,比如實驗出現(xiàn)白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實驗現(xiàn)象進(jìn)行一一解析。1.白板現(xiàn)象在完成所有實驗步驟進(jìn)行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:試劑已過保質(zhì)期,不同批次稀釋液交叉使用。錯加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過程中,酶標(biāo)記物被污...

  • 2022

    4-23

    吉姆薩染液由天青,伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。但本法對細(xì)胞核和寄生蟲著色較好,結(jié)構(gòu)顯示更清晰,而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差?;痉桨笇嶒灢牧显浑s交玻片試劑、試劑盒吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯儀器、耗材染色盤培養(yǎng)箱濾紙實驗步驟1.將顯影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盤中。(1)1個盤:pH6.810mmol/l磷酸鈉緩沖液,所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。(2)3個盤:水。(3)脫水系列溶液:①3個盤:分別盛50%、70%和95%乙醇。②2個盤:盛有...

  • 2022

    4-23

    蛋白提取組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織)1、頸椎脫臼處死小鼠,75%乙醇擦拭皮膚,剪開腹腔,剪切肝臟組織。2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。3、稱取0.6g左右肝組織,在平皿中剪碎組織,并轉(zhuǎn)移到勻漿器。4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF(20ug/2ml)。5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液,迅速加入勻漿器,冰浴條件下充分研磨。6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。7、4℃,15000rpm,離心10min。8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。9、進(jìn)行蛋白定量,-80...

  • 2022

    4-23

    1.對于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次。2.如果細(xì)胞貼得不牢,可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。3.用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘,用PBS洗滌一次。4.將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)源性過氧化物酶封閉液,室溫孵育10分鐘,PBS充分淋洗;5.滴加正常山羊血清封閉液,室溫30分鐘,甩去多余液體;6.滴加一抗工作液,37℃孵育2h(或4℃過夜),然后PBS充分淋洗;7.滴加兔/鼠二抗工作液,室溫孵育1h,PBS充分淋洗;8.DAB顯色5-10分鐘,在顯微鏡下掌握...

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